1. AAV-CRISPR/Cas9による体細胞GUCY2D遺伝子編集を介してマウスとマカクの網膜の構造・機能を改変
[出典] "Somatic gene editing of GUCY2D by AAV-CRISPR/Cas9 alters retinal structure and function in mouse and macaque" McCullough KT [..] Boye S. Hum Gene Ther. 2018 Oct 25.
  • 網膜グアニル酸シクラーゼ-1(retGC1)をコードするGUCY2D遺伝子の機能獲得変異は、常染色体優性錐体杆体ジストロフィー (CORD6)の主たる病因;マウスとマカクの光受容体in vivoで、AAV-CRISPR/Cas9によりretGC1をノックアウトと網膜の構造・機能改変を実現;マカクにおいて目に炎症を引き起こすT細胞応答は見られず;CORD6遺伝子治療への手がかり
2. [プロトコル]ヒト多能性細胞 (hPSCs)の高効率なCRISPR-Cas9ゲノム編集
[出典] "Highly Efficient CRISPR‐Cas9‐Mediated Genome Editing in Human Pluripotent Stem Cells" Maguire JA,  Cardenas‐Diaz FL, Gadue P,  French DL. Curr Protoc Stem Cell Biol. 2018 Oct 24.
  • CRISPR-Cas9ゲノム編集において、DSB修復用のドナーとなるオリゴヌクレオチド (ssODN)を2種類 (標的変異導入用と野生型) [*]を供することで、アレルの一方に目的とする精密な編集を加え、もう一方のアレルへのindel誘導を抑制する手法を実現し、かつ、形質導入とスクリーニングを簡素化した。
  • [*] 2種類のssODNsにはサイレント変異を導入しておくことで、gRNAによる切断から保護し、スクリーンを簡素化した。
3. [特許] CRISPRエフェクターシステムに基づくマラリア検出
[出典] US2018/0305773 "CRISPR effector system based diagnostics for malaria detection
  • 公開日:2018-10-25
  • 発明者:Abudayyeh O, Collins JJ, Gootenberg J, Zhang F, Lander ES, Neafsey D,  Early A 
  • 権利者:Broad Inst, MIT, Harvard College.
  • SHERLOCK関連特許:2018-02-23 CRISPRによる核酸検出・診断 (DETECTRとSHERLOCK) - SHERLOCK (Specific High Sensitivity Enzymatic Reporter UnLOCKing)
4. [レビュー] 形成外科と再建手術へのCRISPRゲノム編集技術の勧め
[出典] "CRISPR Craft: DNA Editing the Reconstructive Ladder" Roh DS, Li EBH, Liao EC. Plast Reconstr Surg. 2018 Nov 1.
  • 頭蓋顔面奇形の発生生物学と治療、創傷治癒と組織修復、細胞療法と再生工学、皮弁(flap)と血管形成などへの応用を議論
5. [プロトコル]Cas9トランスジェニックマウス系統からゲノム編集が加えられた一肝細胞を同定し解析する
[出典] "Isolation and Analysis of a Genome-Edited Single-Hepatocyte from a Cas9 Transgenic Mouse Line" Sakurai T, Kamiyoshi A, Ohtsuka M, Gurumurthy CB, Sato M, Shindo T. In: Liu C., Du Y. (eds) Microinjection. Methods in Molecular Biology. 2018 Oct 24.
  • プロトコルの元論文紹介crisp_bio記事:CRISPR関連文献メモ_2016/02/04 -1. Cas9を発現させたマウスにsgRNAを導入する多重遺伝子編集法:桜井敬之 (信州大学)

6. [プロトコル] コンディショナルノックアウト(cKO)マウス作出:CRISPR/Cas9とssDNAオリゴヌクレオチドを利用して、2つのloxPサイトを順次cisに導入
[出典] "Generation of Conditional Knockout Mice by Sequential Insertion of Two loxP Sites In Cis Using CRISPR/Cas9 and Single-Stranded DNA Oligonucleotides" Liu Y, Du Y, Xie W, Zhang F, Forrest D, Liu C. In: Liu C., Du Y. (eds) Microinjection. Methods in Molecular Biology. 2018 0ct 24
  • 理論上は、CRISPR/Cas9と共に、sgRNAsとドナーとなるオリゴヌクレオチド2組を、同時に胚に導入することで、loxPペアをゲノムに挿入し、Creによってノックアウトを誘導することが可能であるが、実際には、HDRを介したオリゴのノックイン効率が極めて低く、また、2箇所にノックインされたloxPの間の領域が欠損するリスクを伴う;この課題を、loxPを1箇所に挿入したマウスを作出し、次に、その胚に第2のloxPを挿入することで解決し転写因子Six6のcKOマウス系統作出
7. [プロトコル] CRISPR/Cas9システムと 体細胞核移植 (SCNT)によるヤギ遺伝子ノックアウト
[出典] "Gene Knockouts in Goats Using CRISPR/Cas9 System and Somatic Cell Nuclear Transfer" Fan Z, Yang M, Regouski M, Polejaeva IA. In: Liu C., Du Y. (eds) Microinjection. Methods in Molecular Biology. 2018 Oct 24.