（創薬等PF・構造生命科学ニュースウオッチ 2016/06/04）
- [論文] CRISPRによる生細胞中での遺伝子座のラベル付けをRNAアプタマーを利用して２色化
- Corresponding author: Siyuan Wang (Harvard University)
- これまでの多色ラベル化は異なる微生物種由来の不活性化Cas9（dCas9）の併用によって実現されていたが、今回、特性が詳細にされているStreptococcus pyogenes 由来dCas9に、RNAアプタマー（MS2またはPP7）を組み合わせることで２色化を試み（挿入図左）、テロメアの反復配列で実証。
- RNAアプタマーをsgRNAのテトラループおよびステムループ２（挿入図右）に結合することでS/N比が向上。
- [レビュー] CRISPR/Cas9によるヒトゲノム工学と疾患研究
- Authors: Xin Xiong1, Meng Chen2, Wendell A. Lim1, Dehua Zhao2, and Lei S. Qi2 (1UCSF; 2 Stanford U.)
- 138報の文献を引用しつつ遺伝子編集、転写制御、ゲノム可視化およぶエピジェネティクス修飾に関するCRISPR/Cas9技術開発の最新動向をレビューし、機能ゲノミクス（ゲノムワイドでの遺伝子スクリーニングを中心として）と医療（疾患モデルの作出、遺伝子治療、オフターゲット低減など）における応用について論じた。
- [短報] CRISPR/Cas9 RNPによるブタ体細胞への遺伝子ノックイン
- Corresponding author: Bhanu P. Telugu (University of Maryland)
- RISPR/Cas9 RNPを利用し、低分子SCR7によってDNAリガーゼⅣとNHEJパスウエイを阻害してHDR効率を高めることによって、ブタのCOL1A 遺伝子の下流に偽attPサイトを高効率でノックインし、続いて、phiC31インテグラーゼを介してGFP外来遺伝子を導入するプラットフォームを構築。
- [論文] 減数分裂特異的プロモーターを介したCas9発現によって標的突然変異導入を効率化
- Corresponding author: Magdy M. Mahfouz (King Abdullah University of Science and Technology)
- CRISPR/Cas9によるシロイヌナズナのT１世代へのホモ変異/両アレル変異導入は効率が低かった。今回、減数分裂Iに特異的なプロモーター（AT4G40020）を介してCas9を発現させることで、T1世代変異体を28%の高い効率で実現。また、３種類の遺伝子を標的としたT１世代変異体の生成にも成功。
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