[出典] "Extensive adaptive immune response of AAVs and Cas proteins in non-human primates" Xiao P, Bai R, Zhang T [..] Chen Y. bioRxiv. 2019-03-25.
CRISPR-Casシステムはその利便性と効率の良さから遺伝子編集に広く利用され、遺伝子治療の標的細胞への送達には安全性と効率の良さからAAVsが最も有力とされてきた。しかし、ヒト血清にSpCas9とSaCas9に対する液性免疫と細胞性免疫が内在していることが見出され、in vivo CRISPR遺伝子編集に対する新たな懸念が生じてきた。
また、遺伝子治療のためのCRISPR-Casシステムの送達手段として、遺伝子治療用ベクターとして実績があるAAVsが有力であるが、ヒトと非ヒト霊長類 (non-human primates, NHPs)に内在するAAVsに対する中和抗体によって形質転換効率が影響を受け、さらに、AAVsのカプシド・タンパク質がT細胞に認識されることから、CRISPR-Casによる遺伝子治療には、AAVsに対する細胞性免疫も懸案事項である。
また、遺伝子治療のためのCRISPR-Casシステムの送達手段として、遺伝子治療用ベクターとして実績があるAAVsが有力であるが、ヒトと非ヒト霊長類 (non-human primates, NHPs)に内在するAAVsに対する中和抗体によって形質転換効率が影響を受け、さらに、AAVsのカプシド・タンパク質がT細胞に認識されることから、CRISPR-Casによる遺伝子治療には、AAVsに対する細胞性免疫も懸案事項である。
昆明理工大学Yongchang Chenら中国研究グループは今回、ヒトに最も近いモデル動物であるマカクサル (アカゲザルとカニクイザル)に加えてイヌならびにSPFマウスの、SaCas9、SpCas9、AsCas12aならびにLbCas12aに対する液性免疫応答を測定した。また、マカクサルについては、AAV8とAAV9に対する中和抗体を測定した。
- ELISAにより、1~12歳のマカクサルの血清において、AAV8とAAV9に対する中和抗体を検出した (抗体価は年齢依存：原投稿 Fig 1引用下図参照)。
- サル、イヌおよびマウスの血清全てについて、合成・精製したSaCas9、SpCas9、AsCas12aおよびLbCas12aの全てについて検出した (原投稿Table 1引用下図参照)。
- SpCas9に対する抗体については定量的比較も行い、ELISAおよびウエスタン・ブロッティングのいずれの結果も、SPFマウスでの抗体価がサルとイヌよりも顕著に低いことを見出した (原投稿Fig. 2引用下図 b/f 参照)。
また、野生型サル、CRISPR/Cas9編集を加えたサルおよびTALEN編集を加えたサルの間では、SpCas9に対する抗体レベルに有意差がなかった (原投稿Fig. 2引用上図右 c/d/e 参照)。 - (*) 研究グループは、ヒトとサルに内在していることが示されたCRISPR-Casに対する適応免疫応答 (Pre-existing Adaptive Immune Responses against CRISPR-Cas nuclease)をPAIR-Cと表記
PAIR-C関連crisp_bio記事
- CRISPRメモ_2018/01/07 [第2項] ヒトはSpCas9とSaCas9に対する抗体を帯びている
- CRISPRメモ_2018/04/06 [第1項] ヒト細胞はSpCas9に対して特異的なエフェクターT細胞と制御性T細胞を生成する
- CRISPRメモ_2018/06/20-1 [第5項] 米国コホート由来血清中に、Cas9導入に先んじて内在している抗Cas9抗体は、先行報告*よりも少量
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