1.  [プロトコル]ヒト結腸腺癌由来HCT116細胞株をモデルとする哺乳類細胞逆遺伝学を実現するCRISPR/Cas9ノックアウト
[出典] PROTOCOL "CRISPR/Cas9-based knockout pipeline for reverse genetics in mammalian cell culture" Spiegel A [..] Sarov M (MPI Cell Biology and Genetics). Methods 2019-04-30.
  • CRISPR/Cas9が誘導するHDRを介した単一対立遺伝子性の遺伝子トラップにより、もう一方の対立遺伝子が修復誤りが起こりやすいNHEJ過程により高頻度で破壊されることから、標的遺伝子の機能喪失に至る。
2. [特許] 重症複合免疫不全症 (SCID)とオーメン症候群の遺伝子治療
  • 公開日 2019-04-18. 発明者 Yang Y, Cowman CA, Lundberg AS, Cost GJ. 権利者 CRISPR Therepeutics AG
  • CRISPR-Casシステム・ゲノム編集技術によりIL7受容体の発現、機能または活性を調節
3. [特許] 標的DNAから次世代シーケンシング用ライブラリを、Cas9を利用して、単一チューブで調整する法
  • 公開日 2918-04-18. 発明者 Church GM, Pruitt BW, Terry RC. 権利者 President and Fellows of Harvard College
  • 標的DNAを、Cas9、gRNAs、好熱性DNAリガーゼならびにシーケンシング・アダプターを含む溶液に投入する。サーマルサイクリングを経て切断した標的領域に、温度依存ライゲーションによりシーケンシング・アダプターを接合する。
4. [ハイライト] 機能ゲノミクスにより、合成致死の標的に優先順位をつける
[出典] RESEARCH HIGHLIGHT "Prioritizing synthetic lethal targets with functional genomics" Seton-Rogers S. Nat Rev Cancer 2019-04-29.
 「DNA修復機構に一定の不全が生じた癌細胞はその生存をATP依存性ヘリカーゼである酵素WRNに依存する」とした最近の論文4報をハイライト (crisp_bio記事参照):
5. CRISPR-Cas9による植物の指向性進化 (directed evolution)を実現
[出典] "CRISPR directed evolution of the spliceosome for resistance to splicing inhibitors" Butt H [..]  Mahfouz MM. Genome Biology 2019-04-30; [RESEARCH HIGHLIGHT] "CRISPR enables directed evolution in plants" Yingxiao Zhang, Yiping Qi (U. Maryland). Genome Biology 2019-04-30
  • King Abdullah University of Science and Technology (KAUST)とUniversite Paris-Saclayの研究チームは、イネのスプライシング因子3Bサブユニット1 (Splicing Factor 3B subunit), OsSF3B1,を標的とするCRISPR-Cas9による指向性進化を実証した。
  • SF3B1遺伝子は真核生物で保存されているRNAスプライシングの必須遺伝子である。SF3B1を標的とするヘルボキシジエン (GEX1A)とプラジエノリドB (PB)は、ヒトではスプライシング阻害剤に位置付けられ、除草剤に利用されている。
  • 研究チームは、薬剤によるゲノムワイドでのスプライシング阻害がもたらす副作用に注目し、標的遺伝子全域を標的とするsgRNAsライブラリによる変異導入とGEX1Aを含有する培地による選択を経るCRISPR-Cas9指向性進化により、GEX1A耐性をもたらすOsSF3B1変異体を作出・選別した (Fig. 1引用下図参照)。directed evolution
6. [レビュー]  CRISPR-Cas9ゲノム編集技術の真菌と卵菌への展開
[出典] REVIEW "CRISPR-Cas9 genome editing approaches in filamentous fungi and oomycetes" Schuster M, Kahmann R (MPI Terrestrial Microbiology). Fungal Genet Biol 2019-04-29.
  • これまでに、糸状菌と卵菌の40種類以上についてCRISPR-Cas9ゲノム編集システムが確立されてきた。その現状と将来を展望。
7. コウジカビの効率的ゲノム編集を、Cpf1 (Cas12a) により実現
[出典] "Cpf1 enables fast and efficient genome editing in Aspergilli" Vanegas KG, Jarczynska ZD, Strucko T, Mortensen UH (Technical University of Denmark). Fungal Genet Biol 2019-05-01.
  • 5′-NGG-3′ PAMに縛られるSpCas9に代えて、Aspergillus nidulansにコドン最適化した5'-TTTN-3' PAMのLbCpf1によるゲノム編集が実用になり得ることを示した。
8. ピーナッツのオレイン酸の生産性を向上させるFAD2遺伝子の新たな変異を特定
[出典] "Mutagenesis of FAD2 genes in peanut with CRISPR/Cas9 based gene editing" Yuan M [..] He Guohao. BMC Biotechnology 2019-04-29.

9. Cas9を大腸菌由来のIPTG依存性プラスミドで送達し、ストレプトマイシンによるカウンターセレクション用マーカを付加したgRNAを除去容易な (curable)プラスミドで送達することで、効率的な大腸菌ゲノムへの点変異誘導・欠失・挿入を実現
[出典] "Escherichia coli vectors having stringently repressible replication origins allow a streamlining of Crispr/Cas9 gene editing" Srinivasa S, Hu Z, Cronan JE. Plasmid 2019-04-29.