CRISPRメモ_2019/07/21 (6件) : crisp

1. DNAアプタマーを介したPD-1阻害による癌免疫療法

[出典] "Cas9-edited immune checkpoint blockade PD-1 DNA polyaptamer hydrogel for cancer immunotherapy" Lee J, Leb QV, Yang G, Oh YK. Biomaterials. 2019-07-15.

ソウル国立大学の研究チームは今回、Cas9/sgRNAで切断されるとPD-1を阻害するDNAアプタマーを生成する"ポリアプタマーDNAハイドロゲル (以下、PAH)"を設計開発し、これによって、脾臓細胞のサイトカイン分泌機能が効率的に活性化されることを示した。
In vivo分子イメージングにより、Cas9/sgRNAと同時注入したPAHが、単独のハイドロゲルやDNAアプタマーよりも長時間注入部位にとどまり高い抗腫瘍性を示し、さらに、Cas9/PAHによって腫瘍組織への免疫細胞浸潤が亢進することが明らかになった。

2. [レビュー] 心臓の研究と療法を変えるCRISPR技術

[出典] REVIEW "CRISPR Craze to Transform Cardiac Biology" Van Kampen SJ, van Rooij E (University Medical Center Utrecht). Trends Mol Med 2019-07-17.

CRISPR技術の基本；CRISPRツールボックスの応用例 (レビューFigure 2引用下図左参照); CRISPR toolboxの改良・拡充 (レビューFigure 3引用下図右参照)；CRISPR技術一般および心臓への展開に伴う課題

3. [レビュー] 植物科学におけるCRISPR技術のこれまでとこれから

[出典] REVIEW "The emerging and uncultivated potential of CRISPR technology in plant science" Zhang Y, Malzahn AA, Sretenovic S, Qi Y. Nat Plants 2019-07-15.

CRISPR技術による植物ゲノムの編集が初めて報告された2013年以来のCRISPRツールボックスの多様化と拡大 (Cas9改変と新規Cas; エフェクタータンパク質の標的への誘導; DNAに加えてRNAターゲッティング)；CRISPR-Cas発現のシステムと多重化；一塩基編集 (CBE/ABE)による精密編集)；遺伝子の置換と挿入 (HDRの効率)；転写調節とエピゲノム編集；植物ゲノム編集の課題と好機 (至適温度, トランスジーンフリー, 多倍体植物, フローラルディップ法による生殖細胞系列編集, オフターゲット, CRISPR技術と他の新技術との融合 [レビューFig. 4参照 ])；展望

4. CRISPR/Cas9とデュアルgRNAを利用することで、異質4倍体ダイズにおいて脂肪酸不飽和化酵素のホメオロガスな遺伝子 (FAD2-1AとFAD2–1B)高効率編集を介して、オレイン酸と、リノール酸およびα-リノレン酸の含有量を調節

[出典] "Demonstration of highly efficient dual gRNA CRISPR/Cas9 editing of the homeologous GmFAD2–1A and GmFAD2–1B genes to yield a high oleic, low linoleic and α-linolenic acid phenotype in soybean" Do PT [..] Stacey MG. BMC Plant Biol 2019-07-15.

CRISRP/Cas9ベクターの設計について原論文Fig. 1引用下図参照；
T0世代の40%にホメオロガスFAD2遺伝子双方のヌル変異が存在；T1世代でトランスジーン・フリーのホモ接合体遺伝子ダイズが得られ、オレイン酸含量が > 80%増加し、リノール酸含有量が1.3-1.7%へ減少

5. Cas9-sgRNAによる胎児線維芽細胞におけるHR遺伝子ノックアウトと体細胞移植により、ヘアレス遺伝子ノックアウト (HR-KO)ブタを作出

[出典] "Hairless-knockout piglets generated using CRISPR/Cas9 exhibit abnormalities in the skin and thymus" Gao QS, Xuan MF [..] Yin XJ. Exp Anim. Accepted 2019-02-15.

延辺大学の研究チームが、無毛症や稀に免疫不全を伴うHR遺伝子欠損にともなう疾患モデルとなるブタ系統を樹立

6. CRISPRiによりhemB遺伝子の発現を精密に調節することで、E. coliの5-アミノレブリン酸 (5-ALA)生産を亢進

[出典] "Fine-tuning of hemB using CRISPRi for increasing 5-aminolevulinic acid production in Escherichia coli" Su T [..] Qi Q. Front Microbiol. Accepted 2019-07-12.