1. マイクロアレイ上での固相トフェンスフェクションを介したアレイ型CRISPRスクリーン
[出典] A solid‐phase transfection platform for arrayed CRISPR screens. Serçin Ö [..] Mardin BR. Mol Syst Biol. 2019-12-23.
　BioMed X Innovation Centerを主とするドイツ研究グループは今回、gRNAsをスクロースとゼラチンによりマイクレアレイの各ウエルに固定し、Cas9を発現させた細胞を播種することで、非転換細胞と形質転換細胞 (癌細胞)およびヒト初代細胞を対象とする遺伝子編集と、顕微鏡、フローサイトメトリーおよび細胞生存アッセイによるハイスループットスクリーンを実現した。

2. [レビュー] RNAにガイドされるCas9とCas12aヌクレアーゼによるDNA切断
[出典] Editor's cut: DNA cleavage by CRISPR RNA-guided nucleases Cas9 and Cas12a. Swartjes T, Staals RHJ, van der Oost J. Biochem Soc Trans. 2019-12-2. 
　Cas9とCas12aによるDNA切断の機序・構造基盤をまとめ、PAM縛り・切断効率とゲノム編集効率、オフターゲット作用をめぐる課題、ならびに、BE、PEおよびとランスポゾンとの協働の新展開に言及し、Casヌクレアーゼの改造と探索と新たな応用技術開発に期待

3. [特許公開] タイプ II-C Acr (anti-CRISPR)関連
[出典] US 20190382741A1. ANTI-CRISPR COMPOUNDS AND METHODS OF USE.
4. [プトロコル] CRISPR-Cas9システムによりショウジョウバエ培養細胞の内在遺伝子を蛍光標識するssDNA Drop‐In法とCRISPaint法
[出典] Use of the CRISPR‐Cas9 System in Drosophila Cultured Cells to Introduce Fluorescent Tags into Endogenous Genes. Bosch JA [..] Mohr SE. Curr Protoc Mol Biol. 2019-12-23. 
　蛍光タンパク質をノックインする標的遺伝子ごとに長い相同アームを含む大きなドナー・プラスミドのクローニングを必要としないssDNA Drop-In [1] とCRISPaint [2,3] のプロトコルを解説

[参考crisp_bio記事・論文]
  1. 2019-09-12 100 ntと短い相同アームを利用することでHDRを介したCRISPRノックインを効率化
  2. CRISPaint allows modular base-specific gene tagging using a ligase-4-dependent mechanism. Schmid-Burgk JL, Höning K, Ebert TS, Hornung V. Nat Commun. 2016-07-28. 
  3. Gene knock-ins in Drosophila using homology-independent insertion of universal donor plasmids. Bosch JA, Colbeth R, Zirin J, Perrimon N. bioRxiv. 2019-03-16.
5. 哺乳類細胞においてCRISPR/Cas9を介した相同組換え修復 (Homology Directed Repair)結果から、目的とした組換えが起こった細胞を効率的に選択集積するためのユニバーサル・サロゲイト・レポーター (HDR-USR)を開発
[出典] A Universal Surrogate Reporter for Efficient Enrichment of CRISPR/Cas9-Mediated
Homology-Directed Repair in Mammalian Cells. Yan B, Sun Y [..] Zhang Z. Mol Ther Nucleic Acids. 2019-12-24. 
　西北農林科技大学の研究グループが今回開発したHDR-USRは、Cas9イタ遺伝子発現カセット、ユニバーサルsgRNA発現カセット、ユニバーサルsgRNAの標的配列 (sgT)を含む短縮したピューロマイシン耐性 (Puro-Rイタ)遺伝子、分子内修復テンプレートとなるATGとプロモーターを含まないPuro-R遺伝子配列の４要素で構成され、sgRNAによってsgTが切断され、それが、テンプレートと内在HDRで修復されたか否かを、ピューロマイシン溶液で判定する。
　複数のヒト細胞株内在遺伝子座16種類と、2種類の齧歯類細胞株内在遺伝子座1種類を標的とする実験を行って、単一遺伝子座のHDR編集効率を20.7倍まで改善し、2遺伝子座の同時編集の効率42%を達成し、ノックイン効率8.9倍と両アレル欠損効率35.9倍を実現した。これらの効率は、酵母由来Rad52と直鎖状ss/ds DNAドナーを利用することがさらに向上した。

6. マウスモデルにおけるフェニルケトン尿症  (PKU)の遺伝子治療実現
[出典] AAV-Mediated CRISPR/Cas9 Gene Editing in Murine Phenylketonuria. Richards DY [..] Harding CO. Mol Ther Methods Clin Dev. 2019-12-24. 
　Oregon Health & Science Universityの研究グループは今回、肝臓への向性を帯びた組換えAAV2/8ベクターをキャリアとしてCRISPR/Cas9システムを送達し、NHEJ阻害剤バニリンを併用することで、HDR過程を介して、PKUモデルマウスの肝細胞の一部でフェニルアラニン水酸化酵素 (PAH)の変異を修復した。この修復効果は一生持続し、PAHの活性が一部回復し、血中フェニルアラニン量が顕著に減少し、母性フェニルケトン尿症を予防した。

7. SHERLOCKによりエビの白斑病を迅速検知
[出典] Rapid, CRISPR-Based, Field-Deployable Detection Of White Spot Syndrome Virus In Shrimp. Sci Rep. 2019-12-23. Sullivan TJ, Dhar AK, Cruz-Flores R, Bodnar AG. Sci Rep. 2019-12-23.