11. ヒト初代細胞とマウス骨髄細胞における遺伝子ノックアウトに向けてデリバリ法
[出典] "Efficient gene knockout in primary human and murine myeloid cells by non-viral delivery of CRISPR-Cas9" Freund EC, Lock JY, Oh J [..] Bohlen CJ, Haley B, Murthy A. J Exp Med 2020-05-01.
[Graphical Abstract引用下図参照]
12. [レビュー] 癌・免疫療法に向けたCRISPR/Cas9システムのデリバリ法
[出典] [REVIEW] "Delivery of CRISPR/Cas systems for cancer gene therapy and immunotherapy" Song X, Liu C, Wang N, Huang H, He S, Gong C, Wei Y. Adv Drug Deliv Rev 2020-04-30.
13. HEK293細胞由来小胞はCRISPR/Cas9の安全なデリバリシステムであり、癌細胞で過剰発現している IQGAP1を標的とするsgRNAをエレクトロポレーションした小胞はソラフェニブと相乗的抗腫瘍活性を供する [肝癌細胞にはHepG2由来小胞の方がより蓄積するが抗腫瘍性はHEK293細胞由来小胞が優る]
[出典] "Epithelial cell-derived microvesicles: A safe delivery platform of CRISPR/Cas9 conferring synergistic anti-tumor effect with sorafenib" He C [..] Xiao Z. Exp Cell Res 2020-05-04.
14. pH応答性のシリカ-金属-有機構造体 (SMOF)ナノ粒子による疎水性薬物, 核酸, およびCRISPR-Cas9システムのデリバリー - マウス網膜色素上皮細胞のゲノム編集で実証
[出典] "A pH-responsive silica–metal–organic framework hybrid nanoparticle for the delivery of hydrophilic drugs, nucleic acids, and CRISPR-Cas9 genome-editing machineries" Wang Y [..] Gong S. J Control Release 2020-05-04.
15. バクテリア遺伝子編集効率予測
[出典] "On-target activity predictions enable improved CRISPR–dCas9 screens in bacteria" Calvo-Villamañán A, Ng JW, Planel R, Ménager H, Chen A, Cui L, Bikard D. Nucleic Acids Res 2020-04-30. [Fig. 1 A linear model trained on screening data predicts guide activity.参照]
16. テオフィリン誘導または恒常的プロモータによりCas9の発現レベルを調整することで、CRISPR-Cas9の細胞毒性を回避しつつ放線菌ゲノムの効率的編集を実現
[出典] "Fine‑tuning the regulation of Cas9 expression levels for efficient CRISPR‑Cas9 mediated recombination in Streptomyces" J Ind Microbiol Biotechnol 2020-05-04.
17. CRISPR-Cas12aにより分裂酵母の三重ゲノム編集を実現し、dCas12aに基づくCRISPRiによる遺伝子発現抑制を実現 - 内在pol IIプロモーターを利用
[出典] "CRISPR–Cas12a system in fission yeast for multiplex genomic editing and CRISPR interference" Zhao Y, Boeke JD. Nucleic Acids Res 2020-05-06.
18. 酵母のセーフハーバー部位4ヵ所にCRISPRで標的可能なランディングパッドを組込みことで、ヒトGPCRの機能解析と合成生物学に有用なレポータ株を樹立
[出典] "CRISPR-addressable yeast strains with applications in human G protein–coupled receptor profiling and synthetic biology" Rowe JB, Taghon GJ, Kapolka NJ, Morgan WM, Isom DG. J Biol Chem 2020-05-01.
19. 染色体の然るべき部位にCRISPR-Cas9によりランディングパッド (site-specific insertion landing pad, SSILP)を挿入しておき、効率の低いHDRではなくリコンビナーゼを介したカセット交換 (recombinase-mediated cassette exchange, RMCE)により目的とする形質遺伝子を導入したSSILP系統を交配することで、トウモロコシゲノム上に複合形質遺伝子座 (complex trait locus, CTL)を構築
[出典] "Complex Trait Loci in Maize Enabled by CRISPR-Cas9 Mediated Gene Insertion" Gao H [..] Chilcoat ND. Front Plant Sci 2020-05-05.
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