[出典] "Development of Cellular Models to Study Efficiency and Safety of Gene Edition by Homologous Directed Recombination Using the CRISPR/Cas9 System" Sánchez-Hernández S, Aguilar-González A [..] Martin F. Cells 2020-06-18.
Pfizer-University of Granada-Andalusian Regional Governmentを主とする研究グループは今回、K562細胞をプラットフォームとして、 レンチウイルスベクターで導入したプラスミド上のWAS遺伝子配列を標的として、HDRまたはHITIをベースにしたドナーDNAのノックインの効率と精度を、蛍光パターンから判定可能とするレポーター細胞K562 SEWAS84を樹立した。また、同様にHDRをベースとした遺伝子ターゲッティングの評価を可能とするレポータ細胞K562GF-WAS-P細胞を樹立した [それぞれ、Figure 1とFigure 3を引用した左下図と右下図を参照 (いずれもHDRの場合)]。
樹立したレポータ細胞を利用して、HDRの精度はシステムのデリバリー法に依存しないこと、HITIのように標的サイトをDNAドナーに組込むことで [Figure 2引用右図参照]精度を損なうこと無く効率が向上すること、ならびに、標的サイトのコピー数が多いほど効率と精度と効率が向上することを見出した。
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