[20210227更新] MAVERICC: in vitro CRISPR-Cas9技術により、マーカフリーでワクシニアウイルス組み換え体を効率よくレスキューする : crisp

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2021-02-27 Journal of Molecular Biology誌掲載論文の書誌情報とリンクを追加

2021-01-10 初稿

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[出典] "MAVERICC: Efficient marker-free rescue of vaccinia virus recombinants by in vitro CRISPR-Cas9 engineering" Laudermilch E, Chandran K. bioRxiv. 2021-01-05 (プレプリント) https://doi.org/10.1101/2021.01.05.425447; J Mol Biol 2021-02-24 https://doi.org/10.1016/j.jmb.2021.166896

　ワクシニアウイルス (VACV)をベースとするベクターは、ワクチンおよび癌免疫療法に広く利用されている。しかし、ベクター作製が、VACVゲノムとトランスジーンを帯びたプラスミドの相同組み換えに依存する極めて低効率な過程であるため、マーカを利用して目的とする組み換え体を分離する必要がある。また、CRISPR-Cas9を介して感染細胞においてウイルスゲノムを切断するプロセスを介した手法も試みられたが、野生型ウイルスの子孫ウイルスを完全に除去することができないため、やはり、マーカを利用した選別が必要であった。

　 Albert Einstein College of Medicineの研究チームは今回、マーカ不要で一段階で高純度なVACV組み換え体の獲得を可能とするMAVERICC (marker-free vaccinia virus engineering of recombinants through in vitro CRISPR/Cas9 cleavage)法を開発した [フルテキストPDF版p. 3のGraphical Abstract参照]

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