[出典] "MiniCAFE, a CRISPR/Cas9-based compact and potent transcriptional activator, elicits gene expression in vivo" Zhang X, Lv S, Luo Z [..] Zhou Q, Zhang Z-N, Rong Z. Nucleic Acids Res. 2021-03-22. https://doi.org/10.1093/nar/gkab174
SpCas9のヌクレアーゼ活性を失活させたdSpCas9に転写活性化因子を結合したCRISPRaは，DNA二本鎖切断 (DSB)を介さない標的遺伝子の活性化ツールとして臨床への展開が期待されているが，そのサイズが大きいことから生体内への導入が課題となっている．南方医科大学，同済大学，ならびに曁南大学の研究グループは今回，コンパクトで堅牢なminiCas9アクチベーター (miniCAFE)を開発してこの課題を解決した．
- miniCAFEは，SaCas9 (~3.16 kb)よりも小型なCampylobacter jejuni 由来Cas9 (~2.95 kb)のヌクレアーゼ活性を失活させたdCjCas9に転写活性化因子VPRを結合させた上で最適化したCRISPRaである．
- CjCas9についてはAAVでデリバリーすることでindelsを誘発し，疾患モデルマウスの治療や多重CjCas9による膵臓癌モデル作出が報告されてきたが，CRISPRaへの利用は今回が初めての例である．
- 線虫において，長寿制御遺伝子の活性化を介して寿命を伸ばすことに成功した．
- miniCAFEの単一のDNAコピーだけでヒト細胞での内在遺伝子の活性化が可能であった．
- miniCAFEをAAVでデリバリーすることで，成体マウス肝臓におけるFgf21遺伝子の発現活性化を介したエネルギー代謝の制御も実現した.
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