[出典] "Improved methods and optimized design for CRISPR Cas9 and Cas12a homology-directed repair" Shubert MS [..] Rettig GR. bioRxiv. 2021-04-09 [プレプリント]. https://doi.org/10.1101/2021.04.07.438685
 Integrated DNA Technologiesの研究グループが今回,SpCas9, SpCas9 (D010A), またはAsCas12aとsgRNAのRNPと,DNA二本鎖切断のHDR (相同組換え修復)用のssODNドナーテンプレートを介した精密な遺伝子編集の効率を向上させる設計戦略と最適化された手法を投稿した.
 設計にあたっては,gRNAの選択,ssODNドナーの選択,およびCasヌクレアーゼによるssODNドナー・テンプレートの再切断を予防するためのテンプレートへの変異導入の条件,を検討し,HDR用ドナーテンプレートの設計用オンラインツールを開発した.
 さらに,HDR用ドナーテンプレートを化学修飾し (Alt-R HDR Donor Oligo),NHEJ修復過程を阻害する低分子を併用することで,HDRの効率を10倍まで向上させた.
 開発したオンラインツールは,Webサイトから公開した: THE ALT-R HDR DESIGN TOOL. https://www.idtdna.com/HDR