[出典] "A Cascade Signal Amplification Based on Dynamic DNA Nanodevices and CRISPR/Cas12a Trans-cleavage for Highly Sensitive MicroRNA Sensing" Li X [..] Yan Y. ACS Synth Biol. 2021-05-19. https://doi.org/10.1021/acssynbio.1c00064

　重慶医科大学の研究グループが，標的miRNAがプローブの末端のトーホールド (一本鎖領域)に結合することで誘導される鎖置換反応 [*]を介して，酵素反応を介さずに，標的miRNAのリサイクルを介してプログラム可能なDNA二本鎖を生成すし，このDNA二本鎖がCas12aのコラテラル活性を誘起する手法を開発した．[*] (cascade toehold-mediated strand displacement reaction)

• この手法により，最適条件の下で，70.28 fMまでの標的miRNAを検出可能になった．また、100 fMから100 pMまでの広い線形範囲で検出可能であった．
• 特に，プローブと，Cas12aをガイドするcrRNAのセットの最適設計により，配列特異性が高い6種類のmiRNAs検出が可能になった．
• さらに，細胞や血清から抽出した全RNAにおいて，miR-21をモニターすることも可能なことを示した．

　本手法は，感度，特異性，汎用性，および，取り扱い易さのいずれについても優れており，miRNAバイオマーカーの検出をベースとする疾患の診断や予後のモニターするに有望である．