[出典] "A CRISPR/Cas9 method facilitates efficient oligo-mediated gene editing in Debaryomyces hansenii " Strucko T [..] Martínez JL, Mortensen UH. Synthetic Biology 2021-10-12. https://doi.org/10.1093/synbio/ysab031
 Technical University of Denmarkの研究所グループは今回,CUGフリーなCRSIPR<CUG>/Cas9法を開発し,また,NHEJ経路の破壊を介して,細胞工場として利用されまた期待されている非標準酵母であるD. hanseniiの効率的遺伝子編集を実現した.
  • ドミナントマーカーをベースとするツールセット・デザインにより,Cas9と単一または複数のsgRNAを発現するベクターを迅速に組み立てることができ,多重遺伝子編集を可能とした.
  • また,NHEJ欠損 D. hansenii において,点変異,単一/二重遺伝子欠失の高効率導入を可能にした.
  • 90-ntの一本鎖 DNAオリゴヌクレオチドを利用することで,Cas9が誘導するDNA二本鎖切断からの修復を経て,100%の効率で,正確な編集が可能なことを示した.
  • 本研究で開発したツールは、CUG クレードに属する酵母を含む他の非標準型酵母の遺伝子編集にも迅速に展開可能である.