[出典] "Therapeutic Exon Skipping via a CRISPR-guided Cytidine Deaminase Rescues Dystrophic Cardiomyopathy In Vivo" Li J [..] Chang X. Circulation. 2021-10-26. https://doi.org/10.1161/CIRCULATIONAHA.121.054628
西湖大学と上海栄養・健康研究所などの研究グループが，CRISPR-Cas9によるデュシェンヌ型筋ジストロフィー (DMD)の新規モデルマウス (DmdE4* マウス)の樹立と，塩基エディターの一種であるTAM (Targeted AID-mediated mutagenesis) [*]をsaCas9 (KHH)をベースとした上で，AIDへの機能獲得性変異導入やsaCas9のコドン最適化を介して編集効率を約10倍以上へとエンハンスしたeTAM によって，標題を実証した．
西湖大学と上海栄養・健康研究所などの研究グループが，CRISPR-Cas9によるデュシェンヌ型筋ジストロフィー (DMD)の新規モデルマウス (DmdE4* マウス)の樹立と，塩基エディターの一種であるTAM (Targeted AID-mediated mutagenesis) [*]をsaCas9 (KHH)をベースとした上で，AIDへの機能獲得性変異導入やsaCas9のコドン最適化を介して編集効率を約10倍以上へとエンハンスしたeTAM によって，標題を実証した．
- eTAMとgRNAをAAVを介してDmdE4* マウス新生仔に注入し，投与後2ヶ月または12ヶ月後に解析を行い，エクソンスキップの程度，ジストロフィンの回復，および心筋と骨格筋の表現型の改善を評価した。
- DmdE4* マウスは，寿命の短縮 (約50％), 進行性心筋症, 脊柱管狭窄，筋力の大幅な低下，筋細胞の変性など，ヒトDMDの多くの側面を再現していた．
- 単回投与によって，DMDの転写産物の50％以上でエクソンスキップが誘導され，心臓のジストロフィンを90％まで回復させた．その結果，心室の早期リモデリングが抑制され，心筋や骨格筋の機能が改善され、DmdE4* マウスの寿命が延びた．
- AAVベクターとeTAMの発現は時間と共に徐々に低下したが，ジストロフィンの回復と筋ジストロフィーの病態改善効果が，少なくとも1年間持続した．
[*] TAM法
- “Targeted AID-mediated mutagenesis (TAM) enables efficient genomic diversification in mammalian cells” Ma Y, Zhang J, Yin W, Zhang Z, Song Y, Chang X. Nat Methods. 2016-10-10. http://dx.doi.org/10.1038/nmeth.4027
[関連論文とcrisp_bio記事]
- "Genetic Modulation of RNA Splicing with a CRISPR-Guided Cytidine Deaminase" Yuan J, Ma Y, Huang T [..] Ding Q, Song Y, Chang X. Mol Cell. 2018-10-04. https://doi.org/10.1016/j.molcel.2018.09.002; 2018-10-08 CRISPR誘導シチジンデアミナーゼを介した一塩基編集技術によるスプライシング制御．https://crisp-bio.blog.jp/archives/12720655.html
- "Targeted exon skipping with AAV-mediated split adenine base editors". Winter J [..] Perez-Pinera P. Cell Discovery. 2019-08-20. https://doi.org/10.1038/s41421-019-0109-7; 2019-08-20 CRISPR-SKIP：ABEを分割することでAAV送達を実現し、in vivoエクソンスキッピング療法へと向かう．https://crisp-bio.blog.jp/archives/20873734.htm
- "CRISPR-SKIP: programmable gene splicing with single base editors"Gapinske M, Luu A, Winter J, Woods WS, Kostan KA, Shiva N, Song JS, Perez-Pinera P. Genome Biol. 2018-08-15. https://doi.org/10.1186/s13059-018-1482-5; CRISPRメモ_2018/08/19 [第1項] CRISPR-SKIP：一塩基エディタによるプログラム可能な遺伝子スプライシング．
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