2022-06-04 bioRxiv 投稿がMolecular Cell 誌から査読付き論文として刊行されたことから，その書誌情報を追記し，さらに，日米の研究グループによるCas12c2の構造解析と小型化の論文を紹介したcrisp_bio記事へのリンクを追加．
[注] Cas12c (C2c3)
[出典] "A naturally DNase-free CRISPR-Cas12c enzyme silences gene expression" Huang CJ, Adler BA, Doudna JA. bioRxiv 2021-12-06. [プレプリント] https://doi.org/10.1101/2021.12.06.471469
ヒト細胞，植物，動物のゲノム編集に広く用いられているCas9やCas12などのCRISPR-Cas酵素は，RNAにガイドされて外来のDNA配列を切断することで，免疫応答を微生物に提供している．
- "A naturally DNase-free CRISPR-Cas12c enzyme silences gene expression" Huang CJ, Adler BA, Doudna JA. Mol Cell 2022-06-02. https://doi.org/10.1016/j.molcel.2022.04.020
- 2022-04-05 タイプV-C CRISPR-Casエフェクター酵素'Cas12c2'の構造．https://crisp-bio.blog.jp/archives/28979041.html
[注] Cas12c (C2c3)
[出典] "A naturally DNase-free CRISPR-Cas12c enzyme silences gene expression" Huang CJ, Adler BA, Doudna JA. bioRxiv 2021-12-06. [プレプリント] https://doi.org/10.1101/2021.12.06.471469
ヒト細胞，植物，動物のゲノム編集に広く用いられているCas9やCas12などのCRISPR-Cas酵素は，RNAにガイドされて外来のDNA配列を切断することで，免疫応答を微生物に提供している． Jennifer A. Doudnaの研究チームは今回，CRISPR-Cas12cはDNase活性を帯びていないが [Figure 1引用右図参照]，外来DNAを切断せずに結合することで，転写を抑制しファージ感染からバクテリアを保護することを明らかにした [Mol Cell 論文グラフィカルアブストラクト参照]．
生化学実験からCas12cは，前駆体転写物 (pre-crRNA)から成熟したCRISPR RNA (crRNA)を生成する部位特異的なリボヌクレアーゼであることが明らかになった．さらに，Cas12cによるDNAターゲティングには，crRNAの成熟が不可欠であることも明らかになった．
しかし驚くべきことに，これらのcrRNAは，DNA切断を誘導することなく，
Cas12cの二本鎖DNAへの結合を誘導し，このCas12cのRNAにガイドされるDNA結合活性により，細胞内の蛍光レポータータンパク質の転写を抑制した．
λファージの必須遺伝子 (cro )を標的とするファージプラークアッセイでは，Cas12cによるプラーク減少の程度が，野生型Cas12aに僅かに劣り, dCas12aとほぼ同等であった [Figure 6引用左図参照]．
生化学実験からCas12cは，前駆体転写物 (pre-crRNA)から成熟したCRISPR RNA (crRNA)を生成する部位特異的なリボヌクレアーゼであることが明らかになった．さらに，Cas12cによるDNAターゲティングには，crRNAの成熟が不可欠であることも明らかになった．
しかし驚くべきことに，これらのcrRNAは，DNA切断を誘導することなく，
Cas12cの二本鎖DNAへの結合を誘導し，このCas12cのRNAにガイドされるDNA結合活性により，細胞内の蛍光レポータータンパク質の転写を抑制した．λファージの必須遺伝子 (cro )を標的とするファージプラークアッセイでは，Cas12cによるプラーク減少の程度が，野生型Cas12aに僅かに劣り, dCas12aとほぼ同等であった [Figure 6引用左図参照]．
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