[出典] PROTOCOL "Using Next Generation Sequencing to Identify Mutations Associated with Repair of a CAS9-induced Double Strand Break Near the CD4 Promoter" Hu C, Doerksen T [..] Palinski R (Kansas State University). J Vis Exp 2022-03-31. https://doi.org/10.3791/62583
DSB (DNA二本鎖切断)からの修復過程の研究に,電離放射線や希少な切断エンドヌクレアーゼI-SceIによるDSB誘導に変えて,任意のゲノム遺伝子座を標的することが可能であり,かつDSBに隣接するDNA領域に絞ったシーケンシングからの解析が有効な「Cas9-sgRNAによるDSB誘導」を利用するプロトコルを提示した.具体例として,「CD4遺伝子の上流域におけるDSBの修復に関与する突然変異同定」を取り上げた.
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