[出典] "RPA/CRISPR/Cas12a-Based On-Site and Rapid Nucleic Acid Detection of Toxoplasma gondii in the Environment" Lei R [..] Zhang Q, Yang N, Wang X. ACS Synth Biol. 2022-04-26. https://doi.org/10.1021/acssynbio.1c00620
[著者所属] Institute of Plant Quarantine, 大連大学, 瀋陽農業大学
　著者らは，RPAとCRISPR/Cas12aシステムを組み合わせ、T. gondii をワンポットで検出する携帯型検出器を開発した．
  • 反応の第一工程で，ガラス製マイクロファイバーフィルター装置によって低濃度の試料から効率的にT. gondii を抽出する．
  • 凍結乾燥したRPA試薬とCas12a/crRNA試薬を1本のエッペンドルフチューブに予め収納しておき，両反応を安価なサーマルコントローラ（約37℃）上で行う．
  • このアッセイ法は，T. gondii のB1遺伝子アンプリコンに対して高い選択性を示し，検出限界は3.3 copies/μLであった．
  • 最小限の装置と凍結乾燥試薬を含む携帯用スーツケースを，重汚染埋立地浸出水中のT. gondii の迅速測定に利用できる．