[出典] "Coupling CRISPR interference with FACS enrichment: New approach in glycoengineering of CHO cell lines for therapeutic glycoprotein production" Glinšek K [..] Štrukelj B, Ausländer D, Gaber R. Biotechnol J. 2022-04-28. https://doi.org/10.1002/biot.202100499 [著者所属] University of Ljubljana,Lek Pharmaceuticals d.d. (Slovania), Novartis Institutes for Biomedical Research
 治療用タンパク質のほとんどがグリコシル化されていることから,グリコシル化は治療用糖タンパク質のプロセス依存的な重要品質特性 (CQA: Critical Quality Attribute)とされている.しかし,タンパク質に結合するグリコフォームが極めて不均一なことから,グリコシル化の制御はバイオ医薬品開発において最も困難な課題の一つである.
 著者らは,治療用糖タンパク質開発における新しい糖鎖工学的アプローチを検討し,Fc融合タンパク質の目標とする糖鎖プロファイリングの高速化を実現した.CRISPRi技術とレクチン-FACSソーティングを組み合わせることで,フコシル化に関与する内在性遺伝子を下方制御し,フコシル化レベルが低下したFc融合タンパク質を産生するCHO細胞をさらに濃縮した.
 この手法により,時間的に最適化されたクローン・スクリーニングや細胞株開発の高速化をもたらし,さらに,様々なフコシル化レベルのクローンを単離することができるため,目的とするフコシル化レベルが異なる幅広い糖タンパク質に適用することが可能である.