[注] 体細胞核移植 (somatic cell nucleus transfer, SCNT)
[出典] "Cloning and base editing of GFP transgenic rhesus monkey and off-target analysis" Kang Y, Lai S, Zeng Y, Wang F [..] Ji W, Niu Y. Sci Adv. 2022-07-22. https://doi.org/10.1126/sciadv.abo3123 [著者所属] Kumming U Science and Technology, Yunnan Key Laboratory of Primate Biomedical Research.
中国の研究チームが今回,SCNTによる12歳のトランスジェニックGFPサルのクローニングとABEによる胚の塩基編集を行い,ABEの安全性を評価した.
- はじめに,293T細胞において,ABEmaxを介したA-to-G変換を介して,GFPの不活性化されることを確認した.
- 続いて,GFPを発現するアカゲザル由来の細胞を用いて,ABEmax編集胚 (SCNT-ABE)207個と野生型胚 (SCNT)87個を作成し,胚移植,遺伝子型決定,ゲノム,およびトランスクリプトーム解析を行った.
- SCNT-ABEとSCNTの胚を比較する
OA-SCNT (off-target analysis by somatic cell nuclear transfer)と名付けた新しい方法を用いて,精密なオフターゲット解析を行なった (これまでは,オフターゲット変異と,アカゲザル個体に見られる膨大なSNPsとの識別が困難であった) [Figure 1 A/B/C引用右図参照].
- ABEmaxは,明らかなオフターゲットDNA変異を誘発しないが,編集されたサル胚の35%に,エクソン性である広範囲なオフターゲットRNA変異を誘発することを発見した.
こうして,ABEの臨床応用のために重要な知見が得られた.
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