[出典] "Protocol for gene characterization in Aspergillus niger using 5S rRNA-CRISPR-Cas9-mediated Tet-on inducible promoter exchange" Zheng X, Cairns T, Zheng P, Meyer V, Sun J. STAR Protocols 2022-12-16. https://doi.org/10.1016/j.xpro.2022.101838
[著者所属] Tianjin Institute of Industrial Biotechnology, Key Laboratory of Systems Microbial Biotechnology, National Technology Innovation Center of Synthetic Biology, Technische Universität Berlin；グラフィカルアブストラクト
5S rRNAをsgRNAのプロモーターとして利用するCRISPR-Cas9技術とTet-on遺伝子スイッチを組み合わせて条件付き発現変異体を作製する手法におけるsgRNAとドナーDNAの設計とDNA調製について述べる。さらに、PEGを介したA. niger プロトプラストへの形質転換、ホモ接合体の単離の手順について詳述する。最後に、分離株のゲノムと菌株のバリデーションについて述べる。
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- CRISPR_2018/04/29 [第２項] 5S rRNAプロモーターをgRNA発現に利用することで、Aspergillus niger の高効率なCRISPR/Cas9ゲノム編集を実現；"5S rRNA promoter for guide RNA expression enabled highly efficient CRISPR/Cas9 genome editing in Aspergillus niger " Zheng X, Zheng P, Zhang K, Cairns TC, Meyer V, Sun J, Ma Y. ACS Synth Biol. 2018 Apr 24. https://doi.org/10.1021/acssynbio.7b00456
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