[注] RBM (RNA binding motif) /RNA結合モチーフ)
[出典] "Precise genomic editing of pathogenic mutations in RBM20 rescues dilated cardiomyopathy" Nishiyama T [..] Olson EN. Sci Transl Med 2022-11-23. https://doi.org/10.1126/scitranslmed.ade163 [著者所属] U Texas Southwestern Medical Center.
心筋特異的選択的スプライシング制御因子であるRBMタンパク質20（RBM20）の変異は、家族性拡張型心筋症（familial dilated cardiomyopathyDCM）の一般的な原因である。RBM20の変異の多くは、核内局在を仲介するアルギニン／セリンリッチ（RS-rich）ドメイン内に集まっている。これらの変異は、RBM20の局在異常を引き起こし、心筋細胞の細胞質で異常なリボ核タンパク質（RNP）顆粒を形成し、心臓遺伝子の選択的スプライシング異常を引き起こし、DCMの一因となる。
著者らは今回、ABEとPEによるヒトのiPS細胞由来心筋細胞のRSリッチドメインにおける病原性p.R634Qおよびp.R636S変異の修正の効果を見た。
- ABEを利用してヒトiPS細胞においてRBM20 R634Qを修正したところ、A-to-G変換効率92%を達成し、心筋遺伝子の選択的スプライシングの正常化、RBM20の核局在化の回復、および、RNP顆粒形成の排除が実現した。
- また、PEを利用してヒトiPS細胞においてRBM20 R636S変異の修正を試みたところ、A-to-C変換効率は40%に留まった。
次に、Rbm20R 636Q変異モデルマウスを作製し、ABEによるDCM治療の可能性を検証した。ホモ接合体（R636Q/R636Q）モデルマウスは、重度の心機能障害、心不全、早死を発症したが、これらのマウスにABEmax-VRQR-SpCas9とsgRNAを含むABEをアデノ随伴ウイルス（AAV9）で全身投与すると、心エコー心機能の回復が見られ、寿命が延びた。RNA配列解析から、ABEによる編集によって、マウスで見られた異常な遺伝子発現が正常化した。
これらの知見は、塩基エディターがDCMの有望な治療アプローチとなる可能性を示した。
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