[出典] "Bio-SCAN V2: A CRISPR/dCas9-based lateral flow assay for rapid detection of theophylline" Jiang W, Aman R, Ali Z, Mahfouz M. Front Bioeng Biotechnol. 2023-01-19. https://doi.org/10.3389/fbioe.2023.1118684 [著者所属] King Abdullah University of Science and Technology
 CRISPR/dCas9をベースとする高性能なSARS-CoV-2アッセイ法をBio-SCANとして発表したKUASTの研究チームが今回、非核酸低分子標的を検出するためのリガンド応答性CRISPR-Casプラットフォームを開発し、Bio-SCAN V2として発表した。
 Bio-SCAN V2は、リガンド応答性sgRNA(ligRNA)、ビオチン化dCas9(dCas9-biotin)、6-carboxyfluorescein(FAM)ラベル付きアンプリコン、ラテラルフローアッセイ(LFA)のストリップで構成されている。LigRNAは、sgRNA特異的なリガンド分子の存在下でのみdCas9-ビオチンと相互作用し、リボ核タンパク質(RNP)を形成する。次に、リガンドで誘導されたRNPをFAM標識アンプリコンに暴露して結合させ、リガンド(低分子)の存在をラテラルフローアッセイストリップのテストラインで視覚信号[(dCas9-biotin)-ligRNA-FAM標識 DNA-AuNP complex]として検出する。
 Bio-SCAN V2プラットフォームによって、モデル分子であるテオフィリンを短時間(15分)に検出可能になった。検出限界は2μMを達成した。

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