[出典] "CRISPR screens identify novel regulators of cFLIP dependency and ligand-independent, TRAIL-R1-mediated cell death" Kuehnle N [..] Gotten E. Cell Death Differ 2023-02-18. https://doi.org/10.1038/s41418-023-01133-0 [著者所属] Feinberg School of Medicine (Northwestern U)
 カポジ肉腫関連ヘルペスウイルス(Kaposi’s sarcoma-associated herpesvirus: KSHV)は原発性滲出液リンパ腫(primary effusion lymphoma: PEL)を引き起こす。PELの細胞株は、生存のために抗アポトーシス因子細胞性FLICE阻害タンパク質(cFLIP)の発現を必要とするが、KSHVはこのタンパク質のウイルス性ホモログ(vFLIP)をコードしている。
 細胞性およびウイルス性のFLIPタンパク質には、いくつかの機能があり、最も重要なのは、アポトーシス促進タンパク質(pro-apoptotic)であるカスパーゼ8の阻害とNF-κBシグナルの調節である。著者らは、PEL細胞におけるcFLIPの本質的な役割とvFLIPとの重複の可能性を調べるために、まず、FLIPの標的経路に異なる影響を与えることが知られているヒトあるいはウイルスのFLIPタンパク質を用いてレスキュー実験を行った。
 cFLIPの長短アイソフォームと伝染性軟腫症ウイルスMC159Lは、いずれも強力なカスパーゼ8阻害剤であり、PEL細胞における内在性cFLIP活性の損失を効率的に回復させた。KSHV vFLIPは、内因性cFLIPの欠損を完全に救済することができず、機能的に異なることが明らかになった。
 次に、cFLIPのノックアウトを補う機能欠損を同定するために、ゲノムワイドなCRISPR/Cas9合成レスキュースクリーニングを実施した。これらのスクリーニングと検証実験の結果、cFLIPの正常な標的であるカスパーゼ8とTRAIL受容体1(TRAIL-R1またはTNFRSF10A)がPEL細胞における構成的な死シグナルの促進に関与していることが示唆された。しかし、この過程はTRAIL受容体2やTRAILとは無関係であり、後者はPEL細胞の培養では検出されない。
 cFLIPの必要性は、ER/ゴルジ体常在コンドロイチン硫酸プロテオグリカン合成経路とUFMylation経路、Jagunal homolog 1(JAGN1)またはCXCR4を不活性化することによっても克服される。UFMylationとJAGN1は、コンドロイチン硫酸プロテオグリカン合成やCXCR4ではなく、TRAIL-R1発現に寄与している。
 以上のことから、PEL細胞において、cFLIPは、これまでcFLIPやTRAIL-R1の機能には関与していなかった複雑なER/Golgi関連プロセスの下流で、リガンド非依存のTRAIL-R1細胞死シグナルの阻害に必要であることが示された。