1.PAMは、CRISPR-Cas9をアロステリックに活性化する
[出典] Palermo G, G Ricci C,
Fernando A, Basak R, Jinek M, Rivalta I, Batista VS, McCammon JA. “PAM-induced
allostery activates CRISPR-Cas9.” J
Am Chem Soc. 2017 Aug 2.
- 分子動力学シミュレーションによる仮説
- 【参考ブログ記事】 Cas9は、DNA結合から、gRNAとDNAの相補性をチェックするコンフォメーションを経てDNA切断に至る [出典] Sci Adv 2017 Aug 04;3(8):eaao0027.
2.タイプI CRISPR-Casシステムの多様なCascade
[出典] Patrick
Pausch, Hanna Müller-Esparza, Daniel Gleditzsch, Florian Altegoer, Lennart
Randau'Correspondence information about the author Lennart Randau, Gert Bange
“Structural Variation of
Type I-F #CRISPR RNA Guided DNA Surveillance” Mol Cell 2017 Aug
17;67:1-11. Published online Aug 3. 2017.
5O7H: Cascade type I-Fv (分解能 3 Å) (2017/08/08 編集処理済、登録者の確認・同意待ち)
5O6U: R-loop/Cascade type I-Fv (分解能 3 .25 Å) (2017/08/07 編集処理済、登録者の確認・同意待ち)
- Cascade(CRISPR-ASsociated Complex for Antiviral Defense)は,タイプI CRISPR-Casシステムにおいて、crRNAと標的DNA鎖との二本鎖形成・維持からCas3のリクルートによるDNA切断と担う多サブユニット複合体であり、その多様性が知られている.今回、Shewanella putrefaciens CN32由来のタイプI-Fvカスケードの構造を解析し、他のI-Fカスケード及び タイプI-Eカスケードに対する独特の構造と機能を論じた。
3.細胞に遺伝子操作因子を送達する媒体レトロウイルスベクター
[出典] [レビュー] Elsner C, Bohne J. “The retroviral vector family: something for
everyone.” Virus Genes.
2017 Jul 31.
- レトロウイルス(alpha-; gamma-; Lentivirus; Spumavirus)のゲノム構造と各ウイルスベクターの特徴;ウイルスからのベクター設計;“All-in-one”Tet誘導レンチウイルスベクター;iPSC作出への利用;RNAiへの利用;CRISPR-Cas9への利用
4.CRISPRpred: sgRNAsのオンターゲット活性を高効率で予測するツール
[出典]
Rahman MK, Rahman MS. “CRISPRpred: A flexible and efficient tool for sgRNAs
on-target activity prediction in CRISPR/Cas9 systems” PLoS One. 2017 Aug 2;12(8):e0181943.
- 公的データベースから17遺伝子を対象とするgRNAs5,310件のデータを入手し、ランダムフォレストにより活性予測に1/2/3/4ヌクレオチドの位置特異性とRNA二次構造が重要と判定
- サポートベクターマシンによりsgRNAsの活性判定ツールCRISPRpredを開発、ROC解析など5種類の性能評価を行い、マイクロソフト開発のAzimuth(Nat Biotechnol. 2016 Feb;34(2):184-191. Epub 2016 Jan 18.)を凌ぐと判定.
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