[注] 細胞外小胞：extracellular vesicles (EVs)

[出典] "Identification of scaffold proteins for improved endogenous engineering of extracellular vesicles" Zheng W, Rädler J [..] EL Andaloussi S. Nat Commun. 2023-07-27. https://doi.org/10.1038/s41467-023-40453-0 [著者所属] Karolinska Institutet, U Tartu, Shandong First Medical U, U Duisburg-Essen, Karolinska U Hospital.

　細胞外小胞 (EV) が次世代の薬物送達手段 (担体)として脚光を浴びている。そこで、関心の対象であるタンパク質 (protein of interest: POI) を結合するに適切な足場タンパク質が求められているが、選択肢は限られている。カロリンスカ研究所を主とするスエーデン、エストニア、中国、ドイツの研究チームが、ルシフェラーゼレポーターThermoLuc (Tluxc; 60.5 kDa) を足場タンパク質候補のC末端に結合することで、EV内のPOIを、表面タンパク質および非小胞タンパク質と識別可能とするシンプルで信頼性の高いアッセイ法を開発し [Fig. 1引用右図参照]、足場タンパク質候補のEV選別能を比較した。レビュー論文とプロテオミクスデータベース [*]から集積したタンパク質の中から130 kDa以下のタンパク質を候補とした。

[*] NCI-60細胞、HEK293T細胞から分泌されEVsに豊富なタンパク質、これまでにEVソーティングタンパク質として報告されていたタンパク質、およびEV膜上に存在することが知られているテトラスパニン (Tetraspanin)・スーパーファミリーの全メンバー。

　候補の中から、5種類のEV生産細胞においてEV選別能を発揮するタンパク質24種類を同定し、その中で、TSPAN2、TSPAN3、およびCD63が極めて効率的なEV選別タンパク質として一貫して浮上し、さらに、TSPAN2とTSPAN3が、これまでによく研究されてきたCD63を凌駕することが明らかになった [Fig. 3引用右図参照]。

　TSPAN2とTSPAN3をベースとして設計したEVは、in vitro および生体内での効率的な取り込みが確認され、さらに、十分な工学的可能性 (表面ディスプレイおよび内腔へPOIのロード) によっても、担体としての可能性を示した。