[出典] "Parallelized engineering of mutational models using piggyBac transposon delivery of CRISPR libraries" Nuttle X [..] Talkowski ME. Cell Rep Methods. 2023-12-12/2024-01-22. https://doi.org/10.1016/j.crmeth.2023.100672 [著者所属] Massachusetts General Hospital, Harvard Medical School, Broad Institute
著者らは今回、
CRISPR-Cas9ガイドRNA (gRNA)のライブラリーと誘導性Cas9をpiggyBac (PB)トランスポゾンシステムに組み込み、同種の細胞背景に対して数十から数百のゲノム変異を並行して操作するアプローチを開発した。この方法は、挿入または欠失（indel）およびコピー数多型（CNV）の導入による機能喪失 (LoF) 実験を実現するが、プライムエディティング (PE)を利用することで、特定の塩基変換も誘導可能である。高品質な変異モデルを迅速にスケールアップして確立する本手法は、同系細胞コレクションの開発を促進し同質遺伝子背景のもとで、発生や疾患における何百もの遺伝子や変異の役割を同定可能にする比較機能ゲノミクスに貢献する [グラフィカルアブストラクト引用右図参照]
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