[出典] REVIEW "Advances in miniature CRISPR-Cas proteins and their applications in gene editing" Wu H, Sun Y, Wang Y, Luo L, Song Y. Arch Microbiol. 2024-04-23. https://doi.org/10.1007/s00203-024-03962-0 [所属] Shanghai U, Suzhou Institute of Biomedical Engineering and Technology CAS, U Science and Technology of China.
中国の研究チームが、400から800アミノ酸からなるミニチュアCRISPR-Casタンパク質 (Cas12f, Cas12j, Cas12k および Cas12m) の最新の研究進展と、遺伝子編集分野におけるそれらの実用化についてレビューした。
図表一覧
- Fig. 1 Functional classification of Cas proteins.
- Fig. 2 Schematic of CRISPR-Cas loci and effector proteins for Cas9, Cas12a, Cas12f, Cas12j, Cas12k and Cas12m.
Cas9 (950-1700 aa); Cas12a (750-1500 aa); Cas12f (400-700 aa); Cas12j (~750 aa); Cas12k (~650 aa); Cas12m (~596 aa) - Cas9 (950-1700 aa); Cas12a (750-1500 aa); Cas12f (400-700 aa); Cas12j (~750 aa); Cas12k (~650 aa); Cas12m (~596 aa)
- Fig. 3 Structure and function of Cas12f.
- Fig. 4 Structure and function of Cas12j.
- Fig. 5 A Diagram of the domain organization of Cas12k. B Structural models of the Cas12k
- Fig. 6 Structure and function of Cas12m
[結論]
Cas12fとCas12jは、sgRNAの誘導下で標的dsDNAに特異的に結合し切断できるという点で、Cas9やCas12aと機能的に類似している。しかし、Cas12fはサイズが小さく、そのエフェクター複合体は2つのCas12fタンパク質からなるホモ二量体からなるのに対し、Cas12jのエフェクター複合体は単一のCas12jタンパク質単量体のみを含む。原核細胞と真核細胞の両方において、Cas12fとCas12jタンパク質はともに遺伝子編集において高い効率を持っている。
Cas12kとCas12mはともに天然のCasタンパク質で、標的のdsDNAに特異的に結合するが、切断はしない。Cas12kはシアノバクテリアのDNAトランスポゾンシステムに由来し、dsDNA切断や相同組換えとは無関係に、大きなDNAセグメントの遺伝子挿入を可能にする。Cas12mは標的dsDNAに対して高い親和性を持ち、CRISPRa/iや塩基エディター (CBEとABE) [*]のベースとして利用されている。
[*] dCas12m-CBE1 ; GoABE (Gordonia otitidis Ca12m-TadA-8e; 845 aa)
このレビューは、CRISPRツールボックスを拡大し、精密なゲノム編集ツールを生み出す可能性を開くために、Cas12の多様性を探求し続けることの重要性を示唆している。
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