[*] 参考: crisp_bio 2023-09-30 ノックインの標的部位を発見・切断・挿入するFiCAT法による哺乳類ゲノム工学の臨床応用

[出典] “WS05.06 Integration of the LacZ and CFTR transgene using Find and cut-and-transfer (FiCAT)” Bandara RA [..] Hu J. J Cyst Fibros. 2024 June. https://doi.org/10.1016/S1569-1993(24)00139-5; Abstracts of the 47th European Cystic Fibrosis Confeence 2024-06-05 ~ 06-08.

 嚢胞性線維症 (CF)の肺遺伝子治療は、CFTR遺伝子の機能的コピーを細胞に送達することを目的としている。遺伝子を繰り返し導入することなくCFTRを持続的に発現させるためには、遺伝子を細胞に組み込むことが重要である。CRISPR/Cas9や他のヌクレアーゼが遺伝子の統合を可能にすることが示されているが、これらの戦略のいくつかは相同組換えに依存しているため、統合効率は低い。Find and cut-and-transfer (FiCAT)は、CRISPR/Cas9を用いてDNAの二本鎖切断を生じさせ、Cas9に連結されたpiggyBacタンパク質がドナー(LacZまたはCFTR遺伝子を含む)DNAを標的遺伝子座に転移させる手法である。この技術は、遺伝子組込みに相同組換えを必要としない。本研究では、FiCATシステムを用いてCFTR遺伝子とLacZ遺伝子を統合できるかどうかをテストした。

[著者所属機関] The Hospital for Sick Children (Toronto), Pompeu Fabra U (Barcelona).