エキソヌクレアーゼIII/Cas12aカスケード増幅戦略とスマートフォンベースのポータブル蛍光検出器により, 市販のAFPストリップを複数のRNAのPOCTに再利用する : crisp

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[出典] "Exonuclease III/Cas12a Cascade Amplification Strategy and Smartphone-Based Portable Fluorescence Detector to Repurpose the Commercial AFP Strip for the POCT of Multiple RNAs" Peng X, Mei X, Liu X, Zhang G, Li Y. Anal Chem. 2024-07-31. https://doi.org/10.1021/acs.analchem.4c02366 [所属] Harbin Institute of Technology, Second Clinical Medical College of Jinan U, Shenzhen Hengsheng Hospital；参考図グラフィカルアブストラクト

　中国の研究チームが今回、エキソヌクレアーゼIIIとCRISPR/Cas12a（Exo-III/Cas12a）をカスケードした増幅戦略を提案し、市販のα-フェトプロテイン（AFP）ストリップを再利用するスマートフォンベースのポータブル蛍光検出器（smartphone-based portable fluorescence detector: SPFD）を構築した。

　詳細には、標的で起動されるExo-III/Cas12a戦略は、シグナル増幅を実現し、AFPアプタマーに対する活性化Cas12aのトランス開裂を通じて、磁気ビーズからAFPを遊離させる。磁気分離と移動の後、AFPストリップ上のテスト(F_T)ラインとコントロール(F_C)ラインの蛍光シグナルがSPFDを介してデジタル出力され、F_T/F_Cを判定する。

　このプラットフォームを、miRNA-155、黄色ブドウ球菌の16S rRNA、およびCOVID-19シュードタイプウイルスのORF1a/b RNAにて検証し、それぞれ42 aM、18 CFU/mL、および87 copies/μLという検出限界を達成した。