天然変性領域を組み込むことで, CRISPRa (dCas9-VP64)の転写活性化を亢進 : crisp

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[出典] "Specific multivalent molecules boost CRISPR-mediated transcriptional activation" Chen R [..] Cui H, Chen W. Nat Commun. 2024-08-22. https://doi.org/10.1038/s41467-024-51694-y [所属] Southern U Science and Technology, The First Affiliated Hospital of Hebei North U

　CRISPR/Casベースの転写活性化因子であるCRISPRaは、液-液相分離への関与が知られている天然変性領域（intrinsically disordered proteins: IDR）によって活性化される可能性があるが、そのメカニズムについてはまだ議論の余地がある。中国の研究チームは今回、12種類のよく知られたIDRsをdCas9-VP64アクチベーターに融合し、活性強化への効果を比較した [Fig.1参照]。その結果、相分離機能とは独立にCRISPRaによる転写活性化を増強する7種類のIDRsを特定した。さらに、多価分子のもう一つのクラスであるモジュラー・ドメイン（MD）が、それ単独ではdCas9-VP64活性の増強には効果がないが、dCas9-VP64-IDRと組み合わせると、転写活性化を大幅に増強することを発見した [Fig. 4 参照]。

　さらに、シス-トランス相互作用を最大限にすること（過剰なシス-トランス相互作用）は転写活性化を増強するのではなく抑制すること、ロバストな転写活性化増強に最適なシス-トランス相互作用が存在すること、を発見した。

　最後に、プロモーターとエンハンサーのペアを標的とすることによる相乗効果と [Fig. 5参照]、クロマチン相互作用を介して [Fig. 6参照]、転写活性化がさらに増幅されることを見出した。