[出典] "Rationally designed Campylobacter jejuni Cas9 enables efficient gene activation and base editing" Chen Y, Kang R, Jiang Y, Zheng Q [..] Liang P. Mol Ther Nucleic Acids 2024-10-18. https://doi.org/10.1016/j.omtn.2024.102366 [所属] Sun Yat-sen U, Fudan U, Shanghai Engineering Research Center of Industrial Microorganisms；グラフィカルアブストラクト
サイズの大きなSpCas9に対してコンパクトなCas9オーソログには、高効率なデリバリーが可能で、様々なゲノム工学への応用を期待できる。デリバリーシステムとして最も広く利用されてきたアデノ随伴ウイルス（AAV, 容量 4.7 kb）によるデリバリーには、最もコンパクトなCas9オーソログの一つであるタイプII-C CRISPR CjCas9（984 aa）が魅力的である。しかしながら、CjCas9の編集効率に課題がある。
これまでに明らかにされていた、Cas9と標的DNAのリン酸骨格との結合の度合いとオンターゲットおよびオフターゲットに対する編集活性との間の関係と、CjCas9-sgRNA-標的DNAの三者複合体の構造情報をベースに、しかるべき変異をCjCas9に導入することで、CjCas9の編集効率を向上させた。その上で、ミニチュア転写活性化因子を組み合わせたLDE-CjCas9-VPR（CRISPRa）およびCjCas9から設計した塩基エディター（LDE-CjABEおよびLDE-CjCBE）を開発した。
LDE-CjABEはヒトとマウスの細胞でゲノム編集を効果的に誘導した。AAV送達により、LDE-CjABEはオンターゲット編集効率を高め、オフターゲット編集はマウス網膜では検出されなかった。
LDE-CjCas9のコンパクトなサイズと高い編集効率は、治療応用のための転写活性化および塩基編集ツールセットの標的範囲を広げる。
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