[出典] "Dual mature microRNA-responsive logic biosensing platform based on CRISPR/Cas12a and DNA nanocage" Wen M, Huang Z [..] Ke G, Chen M, Zhang XB. Talanta. 2024-10-23. https://doi.org/10.1016/j.talanta.2024.127078 [所属] State Key Laboratory for Chemo/Biosensing and Chemometrics (Hunan U), The Third Xiangya Hospital (Central South U)；グラフィカルアブストラクト
成熟マイクロRNAは腫瘍形成と進行において重要な役割を果たしている。しかしながら、がんバイオマーカーとしての可能性は、前駆体マイクロRNAの配列や単一マイクロRNAによる偽陽性シグナルの発生によって制限されている。中国の研究チームは今回、YESとNOの２種類の論理ゲートを組み合わせて、この課題解決を試みた [グラフィカルアブストラクト参照]。
- 特定のサイズのポアを備えたDNAナノケージによる第一段階の「YES 」ゲート：プレmiRNA、crRNA、Cas12aタンパク質が排除され、成熟miRNAだけがリンクに固定されたCRISPR/Cas12aのDNAアクチベーターのスプリットされたセグメント(TS)を置換する。
- CRISPR/Cas12aシステムによる第二段階の「AND」ゲート：「YES」ゲートから放出される2本のTS鎖が、非標的鎖（NTS）と結合して完全なアクチベーターを形成し、Cas12aのトランス切断活性が活性化し、蛍光シグナルを生成するに至る。
概念実証実験では、臨床血清中の非小細胞肺がん関連成熟マイクロRNA（miR-21とmiR-205）の検出に成功し、顕著な感度（Lod = 100 pM）と真度（回収率≥90%）を示した。
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