[出典] "Conditionally Activated Cross-Linked crRNAs for CRISPR/Cas12a Based Nucleic Acid Detection" Chen W, Liu L, Cheng L. ACS Synth Biol. 2024-12-13. https://doi.org/10.1021/acssynbio.4c00695 [所属] Institute of Chemistry CAS, Hangzhou Institute for Advanced Study, U CAS；グラフィカルアブストラクト
CRISPR/Casシステム、特にCRISPR/Cas12aは、その卓越した特異性と感度により、核酸検出に革命をもたらした。しかしながら、CRISPR/Cas12aの切断活性は、逆転写（RT）や等温増幅（RPAなど）などの前増幅プロセスに干渉し、検出感度や精度を損なう可能性がある。この問題に対処するために、これまでに、ケージング/デケージング戦略を用いた改良型CRISPR/Cas12aシステムが開発されているが、これらのアプローチでは通常、光吸収性基の広範な最適化や複雑なアッセイ構成が必要となる。中国の研究チームが今回、これらの課題を克服するべく、CRISPR/Cas12aベースの検出のための普遍的で光化学的に制御された戦略を紹介する。
中国チームの戦略では、高分子crRNAを光応答性架橋剤で架橋することで、増幅中に効果的に不活性化し、短時間の光照射で架橋剤を切断して活性化crRNAを放出させることで、迅速な活性化を実現する。この方法は、手間のかかる最適化や修正の必要性をなくし、汎用性が高く、迅速な現場での検出アプリケーションに適している。特に、新しく出現した核酸配列や予期せぬ核酸配列を即座に検出することを可能にし、病原体検出、遺伝子スクリーニング、ポイントオブケア診断への応用もサポートするなど、高い汎用性と応用性を備えている。
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