[出典] "Novel Isothermal Amplification Integrated with CRISPR/Cas13a and Its Applications for Ultrasensitive Detection of SARS-CoV-2" Kim J [..] Yong D, Park HG. ACS Synthetic Biology. 2025-01-21. https://doi.org/10.1021/acssynbio.4c00605 [所属] Department of Chemical and Biomolecular Engineering (BK21 Four) (KAIST), Yonsei U College of Medicine.
韓国の研究チームは、2021年に発表していた新たな等温増幅技術であるニッキング・伸長・連鎖反応ベースの増幅(NESBA)[*] 反応とCRISPR-Cas13aを組み合わせることで、ゲノム核酸を同定する超高感度かつ迅速な戦略を実現し、CESBAと命名し報告した。
[*] "Rapid and accurate clinical testing for COVID-19 by nicking and extension chain reaction system-based amplification (NESBA)" Ju Y [..] Park HG. Biosens Bioelectron 2021-10-20/2022-01-15.
CESBAでは、NESBA反応において標的ゲノムRNA(gRNA)から大量のRNAアンプリコンが等温的に生成され、RNAアンプリコンがCRISPRシステムのcrRNAに結合することで、Cas13aのコラテラル切断活性を活性化する。
CESBAをSARS-CoV-2をモデルとして検証したところ、蛍光法およびラテラルフローアッセイ(LFA)法の両方で、SARS-CoV-2以外のヒト・コロナウイルス(H-CoV)に対して優れた特異性をもって、LoD 1コピー(0.05コピー/μL)が達成された。
さらに、20検体の臨床サンプルを用いてCESBAの臨床応用可能性を検証したところ、感度および特異性がいずれも100%に達した。
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