CAR-T細胞療法は、がん治療に革命をもたらした革新的な標的免疫療法である。しかし、持続的な奏効にはまだ限界がある。最近の研究で、注入前のCAR-T細胞産物のエピジェネティックなランドスケープが治療効果に影響することが示され、その解決策として遺伝子編集が提案されている。しかし、最適な遺伝子編集戦略を決定するためには、さらなる研究が必要である。
ゲノムワイドCRISPRスクリーニングは、耐性メカニズムの調査と遺伝子編集戦略の最適化の両方を行うためのツールとして普及している。しかし、初代細胞への適用には多くの課題がある。ここでは、健康なドナーから採取したCAR-T細胞において、ゲノムワイドCRISPRノックアウトスクリーニングを成功させる方法について述べる。
ここでは、概念実証モデルとして、CD19抗原を標的とするCAR-T細胞の疲弊の把握をとりあげたが、このプロトコルは、さまざまなCAR-Tコンストラクトや腫瘍モデルにおける治療抵抗性のさまざまなメカニズムに対処するために利用可能と考えられる。
[出典] Protocol "Performing an In Vitro Genome-Wide CRISPR Knockout Screen in Chimeric Antigen Receptor T Cells" Stewart C, Manriquez Roman C, Kenderian SS. J Vis Exp. 2025-01-31. https://doi.org/10.3791/67338 [著者所属] Mayo Clinic.
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