カイコは、基礎研究や産業用途に利用されてきた鱗翅目モデル昆虫です。この種では、転写活性化因子様エフェクターヌクレアーゼ (TALEN) が効率的に機能することが知られており、農研機構の研究チームは、プラスミドと一本鎖オリゴデオキシヌクレオチド (ssODN) をドナーとして使用して、ノックアウトおよびノックイン実験用の TALEN 媒介ゲノム編集システムを開発していた。対照的に、CRISPR-Cas9を介したゲノム編集は、特にノックインに関しては、限界があった。
研究チームは今回、カイコにおけるゲノム編集の有用性を拡大するために、CRISPR-Cas9システムの最適化を試みた。 その結果、Cas9 のコドン最適化によりゲノム編集効率が向上し、Cas9 メッセンジャー RNA (mRNA) を使用した場合、sgRNA の利用によって crRNA/tracrRNA よりも高いゲノム編集効率が得られた。また、CRISPR-Cas12a を介したゲノム編集と ssODN を使用した標的配列統合は、どちらも正常に実行された。
[出典] "Enhancements of the CRISPR-Cas System in the Silkworm Bombyx mori " Tsubota T, Takasu Y, Yonemura N, Sezutsu H. CRISPR J. 2025-03-27. https://doi.org/10.1089/crispr.2024.0089 [著者所属] 農研機構
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