[注] PEA (proximity extension assay): 標的タンパク質を認識する一対の特異的抗体を利用する。この抗体には特定のssDNAが結合されており、一対の抗体が異なるエピトープで標的タンパク質に結合すると、2本のDNA一本鎖は近接して互いに補完し合い、DNAポリメラーゼによって伸長して二本鎖DNA鋳型を形成する。結合した標的タンパク質に比例したDNA鋳型を増幅することで、標的タンパク質バイオマーカーを定量可能になる。
子宮頸がんの最も一般的なスクリーニング方法は、細胞診とHPV DNA検出であるが、その感度と特異度には限界がある。中国と米国の研究チームが今回、PEA技術をベースとしたデュアルRPA-CRISPRタンパク質検出システム（DRC-PDS）を導入し、子宮頸がんの腫瘍マーカータンパク質２種類（CEAとSCCA）の同時かつ迅速な定量的に検出を実現した。
DRC-PDSは、Cas12aとCas13aを利用したタンパク質検出用のCRISPRベースの核酸検出アッセイを適応させ、単一チューブでの二重標的検出に使用し、10 aMという低濃度のマーカータンパク質の高特異性検出を可能にする。反応プロセス全体は、手持ち式の機器で1ステップで完了できるため、反応中のエアロゾル汚染を回避できる。携帯型機器と組み合わせることで、この検出システムは地域社会や一時ケア現場での活用に大きな可能性を秘めている。
本研究では、PEA技術をベースとしたデュアルRPA-CRISPRタンパク質検出システム（DRC-PDS）を導入し、CEAとSCCAタンパク質の両方を迅速かつ定量的に検出します。この方法は特異性と感度が高く、携帯型蛍光検出器のみを用いて、単一チューブ内の臨床血清中の2つのタンパク質を定量的に検出できるため、検査室外での子宮頸がんの迅速な診断と治療が可能になります。
[出典] "Ultrasensitive rapid quantitative CRISPR-based detection of cervical cancer tumor marker proteins SCCA and CEA" Chen L, Wang X [..] Pang X. Chem Eng J. 2025-04-08. https://doi.org/10.1016/j.cej.2025.162465 [著者所属] Shandong Normal U, U Pennsylvania, Tiangong U
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