細胞外小胞（EV）は、細胞間で核酸、脂質、タンパク質を輸送することにより、細胞間コミュニケーションを媒介する。この特性により、EVは有望な治療ベクターのベースとされてきた。しかし、EVに搭載されるカーゴの不均一性のため、治療目的のペイロードを持つEVを単離する必要があるが、これは依然として困難である。
米国、ポルトガル、オランダ、スイスの研究者らは今回、特徴的なCD63膜タンパク質を改変した（E-NoMi）EVを作成し、目的のカーゴを担持しているEVの濃縮を実現した。E-NoMiは、EV膜の内側にmCherryを、EV膜の外側にタグ（3xFLAG）を露出させたCD63を特徴とする (NoMi: NanoLuc outside-mCherry inside)。
E-NoMi-EVへの搭載に向けて、EGFP、Creリコンビナーゼ、CRISPR-Casヌクレアーゼ（SaCas9）などのカーゴタンパク質には、mCherryに高い親和性を持つナノボディ（Nb）タンパク質を融合した [FIGURE 1引用右図参照]。 カーゴを担持したE-NoMi-EVは、細胞馴化培地からのFLAGタグを介した捕捉により選別し、捕捉後にタバコエッチウイルス（TEV）プロテアーゼ切断部位を用いてE-NoMi-EV表面から3xFLAGタグを除去する。
さらに、E-NoMi-EVに水疱性口内炎ウイルスG（VSV-G）の融合タンパク質を組み込むことで、カーゴ送達効率が標準的な細胞外小胞の10倍にも及ぶ融合性EVをベースとするベクター（EVV）を作製するに至った。
E-NoMi-EVVによるカーゴの機能的送達は、2種類のマウス脳モデルin vivoにおいて実証された。
[出典] "Engineering of CD63 Enables Selective Extracellular Vesicle Cargo Loading and Enhanced Payload Delivery" Obuchi W [..] Breyne K. J Extracell Vesicles. 2025-06-17. https://doi.org/10.1002/jev2.70094 [著者所属] Massachusetts General Hospital (USA), MGH and Harvard Medical School, U Coimbra (Portual), Leiden University Medical Center (Netherlands), U Geneva (Switzerland)
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