標的に作用するヌクレアーゼシステム、特にCRISPR/Casベースのシステムは、標的遺伝子または転写産物の精密な改変を可能にすることで、ゲノム編集に革命をもたらした。多くの前臨床研究および臨床研究において、この技術がヒト疾患の治療法開発に活用されているが、オフターゲット編集がもたらす遺伝子毒性に関する大きな懸念が臨床応用を遅らせている。
これまでにオフターゲット効果の特定と定量化を目的とした幅広いツール、アッセイ、技術が開発されているにもかかわらず、標準化されたガイドラインが存在しないことが、一貫性がないまま治療法の研究開発が進められている状況を招いている。
この総説では、gRNAの設計、オフターゲット部位の予測、
およびオフターゲット活性の測定に焦点を当て、治療応用を目的とした遺伝子編集研究の安全性確保における主要な課題と潜在的な解決策に考察を加える. [グラフィカルアブストラクト引用右図参照]。
およびオフターゲット活性の測定に焦点を当て、治療応用を目的とした遺伝子編集研究の安全性確保における主要な課題と潜在的な解決策に考察を加える. [グラフィカルアブストラクト引用右図参照]。[図表リスト]
- Figure 1. CRISPR/Cas DNA editors.
- Figure 2. DSB repair pathways and small molecule inhibitors.
- Figure 3. Mechanisms and consequences of OTA (Off-Target Activity)
- Figure 4. Recommended workflow for CRISPR-based genome editing and genomic safety characterization.
- Table 1: In vitro off-target nomination assays (７件)
- Table 2: In vivo off-target nomination assays (11件).
- Table 3: SV detection assays (12件).
[出典] Review "Off-target Effects in CRISPR-Cas Genome Editing for Human Therapeutics: Progress and Challenges" Kalter N, Fuster-García C, Silva A, Ronco-Díaz V, Roncelli S, Turchiano G, Gorodkin J, Cathomen T, Benabdellah K, Lee C, Hendel A. Mol Ther Nucleic Acids. 2025-07-17. https://doi.org/10.1016/j.omtn.2025.102636. [著者所属] Bar-Ilan University (イスラエル), University of Freiburg (ドイツ), San Raffaele Telethon Institute for Gene Therapy (イタリア), Pfizer-University of Granada (スペイン), University of Copenhagen (デンマーク), University College London (英国), AstraZeneca, University College Cork (アイルランド)；参考文献 215件
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