CRISPR-Cas12aは、その堅牢なシグナル増幅により分子診断において革新的な可能性を示してきた。しかし、その持続的な活性状態が、複雑な検出ワークフローにおける時間制御と正確なヌクレアーゼ制御を著しく制限する。首都医科大学（北京）を主とする中国の研究チームが今回、保存されたcrRNAスキャフォールド二次構造自体が、Cas12a活性を制御する可逆的かつプログラム可能なコンフォメーションスイッチとして再利用できることを実証した。
- 長さが調整可能な短い相補的DNAブロッカーを導入することで、長さ依存的にスキャフォールド二次構造を破壊および再構築し、LbCas12aを不活性構造へと変化させる [Scheme 1引用右図 左端から上段へと参照]。
- その後、一本鎖置換または協同的鎖置換の活性化のいずれかによってスキャフォールド構造が回復し、Cas12a活性の時間分解およびオンデマンド回復が可能になる [Scheme 1引用右図 右端から下段へと参照]。
- 保存されたスキャフォールドはアッセイの普遍性を確保する一方で、プログラム可能な再配線はSNVの識別を著しく向上させ、ワンポット等温増幅アッセイとの互換性を可能にし、従来の2段階アッセイに匹敵する分析感度を実現した。
- この制御フレームワークは、Klebsiella pneumoniae および Mycobacterium tuberculosis の検出においてさらに実証された。
[出典]
- "crRNA scaffold remodeling controls CRISPR–Cas12a activity for enhanced performance" Wang Z [..] Sun L, Hao R. Nucleic Acids Res. 2026-03-05. https://doi.org/10.1093/nar/gkag167 [所属] Capital Medical University (Dept Toxicology and Sanitary Chemistry; Laboratory of Respiratory Diseases) (中国), Beijing Key Laboratory of Environment and Aging, National Center for Children's Health, The Second Medical Center of Chinese PLA General Hospital (National Clinical Research Center for Geriatric Diseases)
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