CRISPR/Cas9 GEは機能ゲノミクスの強力なツールとして確立されましたが、特にトランスフェクションが困難な細胞種においては、安全かつ効率的な送達システムが存在しないことから、その威力が発揮されるに至っていません。また、細胞への分子送達に、非ウイルス性のLNP（脂質ナノ粒子）の利用が急速に広がってきましたが、細胞膜の特性の違いにより、細胞株によってトランスフェクション効率が大きく異なります。
シドニー工科大学のWei Deng准教授を責任著者とする Acta Biomaterialia 誌刊行論文において、 市販の脂質系送達剤では改変が困難な細胞種を含む、多様な細胞種においてCRISPR/Cas9 GEを強化するに最適なLNP（脂質ナノ粒子）プラットフォームが紹介されています。
- 研究チームが紹介しているLNPは、100 nm以下の均一な粒子径、低い多分散性、および高い封入効率を示します。
- HEK-293細胞におけるGFPノックアウト率は78.7%に達し、凍結乾燥および再構成後もその効率は維持されました。
- MDA-MB-231細胞におけるLCN2？？？遺伝子のノックアウトは、mRNA発現を90.8%減少させ、市販のLipofectamine™ CRISPRMAX™を用いた場合の51.1%の減少を上回りました。機能アッセイにより、LCN2？？？のノックアウトが細胞増殖と遊走を著しく阻害することが確認されました。
- CRISPR/Cas9とGFP HDRテンプレートの同時導入により、正確なノックインが可能となり、HEK-293細胞では20%以上、MSCおよびDC2.4細胞では8%以上の効率を達成し、Lipofectamine 3000トランスフェクション試薬を大幅に上回りました。
[出典] "An optimised lipid nanoparticle platform enables efficient CRISPR/Cas9 genome editing in hard-to-transfect cells" Xinpu Yang (1), Rui Sang (2), Gyorgy Hutvagner (1), Alex W Hewitt (3), Diangeng Li (4), Yi Li (5), Wei Deng (6). Acta Biomater. 2026-05-28. https://doi.org/10.1016/j.actbio.2026.05.044
- School of Biomedical Engineering, University of Technology Sydney, Ultimo, NSW, 2007, Australia.
- Graduate School of Biomedical Engineering, Faculty of Engineering, UNSW Sydney, NSW, 2052, Australia.
- Menzies Institute for Medical Research, University of Tasmania, TAS, 7005, Australia.
- Department of Academic Research, Beijing Ditan Hospital, Capital Medical University, National Center for Infectious Diseases (BeiJing), 8th Jingshun East Road, Beijing, 100015, China.
- Key Laboratory of Clinical Laboratory Diagnostics (Ministry of Education), College of Laboratory Medicine, Chongqing Medical University, 1 Yixueyuan Rd., Chongqing, 400016, China; Department of Nephrology, Metabolism and Immunology Laboratory for Urological Diseases, The First Affiliated Hospital of Chongqing Medical University, Chongqing, 400016, China.
- 6 School of Biomedical Engineering, University of Technology Sydney, Ultimo, NSW, 2007, Australia.
コメント